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什么是高效液相色谱?

发布时间:2021-08-23

  需要简单回答的基本问题是“什么是高效液相色谱?”简而言之,当有机化合物是非挥发性的、热不稳定的并且具有相对较高的分子量时,高效液相色谱是一种分离有机化合物混合物成分的分析技术。

  被称为流动相的液体载体用于携带注入的样品通过分离柱并到达检测器。在分离柱中,基于物理-化学相互作用分离每个组分,洗脱顺序基于这种相互作用。检测器根据光吸收或折射率的变化、电化学/电导率的变化或简单洗脱分子的尺寸分布来检测分离的成分。


  探测器的响应呈峰形,其面积与存在量成正比。输出由操作软件监测评估,不仅计算响应,还支持操作参数,如进样量、进样顺序、检测波长、洗涤周期等。

  如今,可用软件的高级功能使操作变得非常人性化。用户将大部分时间花在流动相制备、缓冲液和标准品制备以及记录条目上。

  分离科学为分析化学的发展和理解以及更好地控制消费品(如药品、食品和饮料、聚合物、环境监测等)的质量做出了巨大贡献。).主要得益于色谱技术,尤其是HPLC。


  高效液相色谱及其组分介绍

  高效液相色谱是一种流行且通用的技术,可为复杂有机样品中成分的分离、鉴定和定量提供经济的解决方案。乍一看,复杂模块的组装和一堆管道可能会吓到你。然而,在深入了解每个组件的功能后,谜团将开始解开,高效液相色谱系统将成为一个用户友好的设备。如果处理得当,它将确保结果和分析的最高准确性和可靠性。


  这些部分的不同组合是:

  泵
  探测器
  根据应用,燃料喷射器可以产生无限多种配置

  为了生成最可靠的数据,您需要充分了解高效液相色谱系统的组成和高效液相色谱的原理。对每个组件功能的概念性理解将提高您对高效液相色谱系统的舒适度,并确保长期使用和对输出数据的高度依赖。


  液相

  液相以恒定速率泵入带有固定相的色谱柱。在进入色谱柱之前,分析样品被注入载液中。

  到达色谱柱后,根据分析物分子和固定相之间的物理化学相互作用,样品组分被选择性保留。


  流动相

  流动相用于将样品输送到系统中。流动相的基本标准是对样品组分的惰性。通常使用纯溶剂或缓冲液的组合。该流相应地没有颗粒杂质,并且在使用前脱气。


  流动相容器

  这些是用于流动相储存和运输的惰性容器。一般来说,透明玻璃瓶用于方便目视检查容器中的流动相水平。内部安装了不锈钢颗粒过滤器,以去除流动相中的颗粒杂质(如果有)。泵

  流动相流速的变化会影响样品组分的洗脱时间,导致误差。该泵在恒定压力下向色谱柱提供恒定的流动相流量。


  燃料喷射器

  注射器用于将样品以恒定体积注入流动相中。注射的惯性和再现性是保持高精度所必需的。


  圆柱

  色谱柱为不锈钢管,填充有固定相。它是一个重要的组成部分,应根据供应商的说明正确维护,以便在重复操作中获得可重复性和分离效率。


  塔式炉

  分析操作过程中温度的变化会导致分离的洗脱组分保留时间的变化。柱温箱使用空气循环来保持恒定的柱温。这确保了流动相通过色谱柱的恒定流速。


  探测器

  检测器对色谱柱分离的成分提供特定的响应,并提供所需的灵敏度。它必须独立于流动相组成的任何变化。大多数应用需要紫外-可见检测,但是基于其他检测技术的检测器现在也很流行。


  数据采集和控制

  现代高效液相色谱系统是基于计算机的,软件控制操作参数,如流动相组成、温度、流速、注射量和顺序,以及输出的收集和处理。

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